接下来几天,吴哲就埋头进了实验室里。开心网络这边本来两天后就要举行拍卖会的,可国内的一些投资机构纷纷要求把拍卖会安排在了元旦前一天,让他们可以有更多的时间能筹集资金。郭子宜在请示了吴哲后,也同意了这一要求。
吴哲没怎么放心上,他这边终于是把程序给搞了出来,然后把程序丢给了郑义仲。让他不停地输入前面的实验数据, 检验正确率。
而他则开始穿着无菌服在实验室里面做起了sanger测序。他被唐梦带着做了两次后,就能自己独立操作了。
先利用dna聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。
每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dntp),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddntp)。由于ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在g、a、t或c处终止。
终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dntps和ddntps的相对浓度可以调整,使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。
它们具有共同的起始点,但终止在不同的核苷酸上, 可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后可用x-光胶片放射自显影进行检测。
这样一来, 测序的步骤就非常的多,包括了:加入缓冲溶剂,离心分离,热循环,凝胶板的制作到最后的电泳。就算是以吴哲的控制力也不能百分百的把握能每次都能成功。而这些成功后,还需要数据分析和对比。
而且很多dna提取物包括质粒小量制备来说,并不能给出一个可信的dna浓度估计,混杂的染色体dna、蛋白、rna、有机物及无机化合物均可能有260 nm光吸收,核糖核酸酶处理所产生核糖核苷酸,虽然它们在电泳后dna样品的前面,也并不能观察到。这更加的拉慢了实验的进度。
吴哲进过反复的研究,那个数学模型只能治标不能治本。不直接对实验本身进行改变的话,对本质来说,没什么太大的作用。
吴哲出了实验室,他现在也没什么好的办法。如果改进的话从哪一步入手, 前面的方法暂时没什么办法,那凝胶板和电泳有没有什么可以改变的。
吴哲是知道后来有了新的测序手段的, 因为有段时间, 关于基因检测的商业活动弄得满天飞。后来国家还出台了法规。对于以此牟取暴利的不法分子进行了打击。他隐约记得应该是和芯片的提高有关。但怎么和芯片关联起来,现在的他也一头雾水。
皱着眉头,走进了办公室。
唐梦见吴哲进来,笑嘻嘻地上前把吴哲的双眉给抚平了。
唐梦问道:“实验没成功?怎么还皱着个眉头?你呀,就是进的实验室太少了。多做几次就会习惯了。你问问郑师兄,他是不是这样过来的。”
郑义仲听到唐梦喊他,也是含糊说道:“嗯,没错。”
这两天他可给这两口子给压榨死了,每天都通宵测试数据,这会还精神恍惚的。可谁让他这两天体重有明显下降呢?吴哲的中药还是很管用的。
只是吴哲和唐梦时不时地狗粮撒下来,他也直呼受不了。心里也越加的发狠要把自己变瘦,到时自己也要找个有大长腿,带大凶之罩的人。咳咳,不能想,想想哈喇子就要下来了。
“没有,成功了,可是效率太低。要想想办法,我一时没有好的解决方法。”吴哲开口回道。
郑义仲听完吴哲的回答, 抬起睡眼惺忪的眼睛,他本来就胖,眼睛显得很小,这会更是成了一条线,看了吴哲一会才道:
谷默
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